Mikrobiyal hücrelerin karışımlarında maya ve bakteri hücrelerinin konsantrasyonlarını eş zamanlı olarak belirlemek, özellikle şeker kamışı biyorafinerilerinde büyük önem taşır. Geleneksel yöntemler, bu hücre tiplerini ayrı ayrı belirlemek için daha fazla zaman ve kaynak gerektirir. Bu nedenle, farklı sayım yöntemlerinin etkinliğini karşılaştırmak, mikrobiyal analizlerin hızlandırılması açısından kritik bir rol oynar.
Şeker kamışı biyorafinerilerinde yaygın olarak bulunan Saccharomyces cerevisiae PE-2 maya suşu ve Lactiplantibacillus plantarum probiyotik bakteri suşu, çeşitli yöntemlerle sayıldı. Bu yöntemler; parlak alan mikroskobu, manuel ve otomatik Yayma-plaka ve Damla-plaka sayımı, akış sitometrisi ve Coulter sayacıydı. 1:1 ve 100:1 maya-bakteri oranlarıyla hazırlanan karışımlar analiz edildi.
Maya Hücre Sayımı
Maya hücre sayımı için akış sitometrisi, Coulter sayacı ve her iki Yayma-plaka yöntemi (manuel ve otomatik) istatistiksel olarak benzer sonuçlar verdi. Buna karşılık, Damla-plaka ve mikroskop tabanlı yöntemler farklı sonuçlar gösterdi. Bu, akış sitometrisi ve Coulter sayacının maya hücre sayımı için daha tutarlı ve güvenilir olduğunu ortaya koydu.
Bakteri Hücre Sayımı
Bakteri hücre sayımı için mikroskop tabanlı yöntem, Damla-plaka ve her iki Yayma-plaka seçeneği ve akış sitometrisi (1:1 oranında) istatistiksel olarak farklı sonuçlar üretmedi. Ancak Coulter sayacı (1:1 oranında) ve akış sitometrisi (100:1 oranında) istatistiksel olarak farklı sonuçlar sundu. 100:1 oranındaki karışımlarda, maya hücre kalıntıları ve bakteri hücreleri arasındaki örtüşme nedeniyle bakteri hücrelerini saymak mümkün olmadı.
Öneriler ve Çıkarımlar
Çalışmanın sonuçlarına göre, her yöntemin belirli avantajları ve dezavantajları bulunmaktadır. Bu yöntemlerin kullanımı sırasında dikkat edilmesi gereken önemli noktalar şunlardır:
- Akış sitometrisi ve Coulter sayacı maya hücrelerinin doğru sayımı için daha uygundur.
- 100:1 oranındaki karışımlarda bakteri hücreleri için mikroskop tabanlı yöntemler tercih edilmelidir.
- Yayma-plaka yöntemleri, hem maya hem de bakteri hücrelerinin sayımı için güvenilir sonuçlar sağlayabilir.
Sonuç olarak, mikrobiyal hücrelerin doğru ve hızlı bir şekilde sayılması, kullanılan yönteme bağlı olarak değişiklik gösterebilir. Her yöntemin kendine özgü sınırlamaları ve avantajları olduğundan, spesifik ihtiyaçlara göre en uygun yöntemin seçilmesi önemlidir.
Orijinal Makale: J Ind Microbiol Biotechnol. 2024 Sep 9:kuae029. doi: 10.1093/jimb/kuae029. Online ahead of print.
